養(yǎng)好RAW 264.7的第一步，是要對(duì)它的基礎(chǔ)培養(yǎng)條件了如指掌，比如生長特性、細(xì)胞形態(tài)、所需的培養(yǎng)基，甚至培養(yǎng)環(huán)境、傳代比例等等，做到知己知彼，才能百戰(zhàn)百勝。

▲RAW 264.7生長圖片

除了基礎(chǔ)條件，其他外界因素也容易引起細(xì)胞的“小脾氣"，比如運(yùn)輸路上的顛簸、傳代方法等等。針對(duì)幾種常見的問題，小普來一 一為大家解答。

小普總是會(huì)收到這類反饋：收到細(xì)胞，期待值滿滿地打開包裝，但在顯微鏡下卻找不到細(xì)胞！

這是因為RAW 264.7 細(xì)胞貼壁較松，快遞運(yùn)輸路上受到顛簸，可能會(huì)脫落。脫落的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)基中不容易聚焦。

這時(shí)候不用擔(dān)心，把細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)箱靜置兩個(gè)小時(shí)就可以看到了。

如果靜置后看到的細(xì)胞仍偏少，請將瓶子里的培養(yǎng)基都轉(zhuǎn)移到離心管里，1200rpm（約250g）離心3分鐘，即可看到沉淀的細(xì)胞。

細(xì)胞全部脫落，慌亂之下可能會(huì)一個(gè)細(xì)胞都找不著。這個(gè)時(shí)候離心驗(yàn)證是較為合適的方法。

將細(xì)胞離心收集，用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞放到新的培養(yǎng)瓶里之后，可能會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞成團(tuán)漂浮、不貼壁的情況。

這種情況下，把細(xì)胞離心收集，用1mL培養(yǎng)基重懸，慢慢地，輕輕地吹打，直到細(xì)胞被吹成單細(xì)胞，就可以重新鋪板了。

RAW 264.7脫落后傾向于抱團(tuán)，抱團(tuán)時(shí)細(xì)胞是活著的，但很難貼壁。記得一定要把聚成團(tuán)的細(xì)胞吹散成單細(xì)胞，不然細(xì)胞很難重新貼壁。

正確的傳代方法是養(yǎng)好RAW 264.7的關(guān)鍵，每一步操作都要細(xì)致入微，稍有不慎細(xì)胞就分化了。

RAW 264.7不能用胰酶消化，許多實(shí)驗(yàn)室用細(xì)胞刮傳代，這是一種非常經(jīng)典好用的方法。

小普在養(yǎng)RAW 264.7細(xì)胞這十幾年里，摸索出一個(gè)更不錯(cuò)的方法：吹打傳代。

吹打傳代操作簡單，對(duì)養(yǎng)細(xì)胞的萌新們更友好，也能更好地控制細(xì)胞分化率。

▲推薦傳代的密度

講了那么多如何處理RAW 264.7分化的情況，那分化了的細(xì)胞到底是什么形態(tài)呢？

養(yǎng)細(xì)胞不易，每個(gè)細(xì)胞對(duì)我們而言，都像是寶寶，含在嘴里怕化了，捧在手里怕摔了。

正是因?yàn)閷?duì)科研的無畏堅(jiān)持，讓我們更有力量接受考驗(yàn)，因?yàn)榭蒲斜旧?，值得敬畏和付出?/p>